N-Ras CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421960

개요

마우스 Nras는 막에 결합된 소형 GTPase인 N-Ras를 암호화하며, GDP 결합 상태와 GTP 결합 상태 사이를 순환하면서 수용체 티로신 키나아제 및 기타 상위 신호로부터의 자극을 신호로 전달합니다. 활성화된 N-Ras는 RAF–MEK–ERK(MAPK) 및 PI3K–AKT를 포함한 핵심 Ras 효과기 경로를 작동시켜 증식, 분화, 세포골격 역학, 생존을 조율합니다. N-Ras 활성의 엄격한 조절은 정상적인 조혈 및 발달 신호에 필수적이며, Ras 경로 플럭스의 교란은 종양성 전환과 염증성 미세환경 반응과도 폭넓게 관련됩니다. 따라서 Nras는 마우스 세포 및 질환 모델에서 Ras 주도의 네트워크 재배선과 경로 간 크로스토크를 규명하는 데 핵심 노드로 기능합니다.

N-Ras CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Nras 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Nras 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Nras의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 N-Ras 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 N-Ras 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Nras 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• N-Ras 기능에 중요한 Nras 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Nras 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• N-Ras CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 N-Ras CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Nras 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  N-Ras HDR 플라스미드 (m) 및 N-Ras HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Nras 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Nras 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.