MYBPHL CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406488

Übersicht

MYBPHL (myosin-bindendes Protein H-ähnlich) kodiert ein mutmaßliches sarkomerisches Hilfsprotein, das überwiegend in quergestreifter Muskulatur exprimiert wird. Dort wird angenommen, dass es mit myosinhaltigen dicken Filamenten assoziiert und zur Organisation der Myofibrillen beiträgt. Durch die Beeinflussung der aktomyosinen Kontraktionsarchitektur ist MYBPHL mit Prozessen wie Sarkomerassemblierung, Stabilität des Zytoskeletts und Mechanotransduktions-Signalgebung in Kardiomyozyten und Skelettmuskelzellen verknüpft. Veränderte Expressionsmuster von Mitgliedern der Myosin-bindenden Protein-Familie wurden im Kontext des kardialen Remodelings beschrieben, was die Nutzung von MYBPHL als mechanistischen Knotenpunkt zur Untersuchung stressresponsiver kontraktiler Signalwege stützt. Die funktionelle Untersuchung von MYBPHL kann Aufschluss darüber geben, wie myofibrillenassoziierte Proteine die Differenzierung von Muskelzellen und kontraktilitätsbezogene Genregulationsnetzwerke modulieren.

Das MYBPHL CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MYBPHL-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MYBPHL-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MYBPHL nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MYBPHL-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MYBPHL-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MYBPHL-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MYBPHL-Exone abzielen, die für die MYBPHL-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MYBPHL-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MYBPHL CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MYBPHL CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MYBPHL-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MYBPHL HDR-Plasmid (h) und MYBPHL HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MYBPHL-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MYBPHL-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.