mucolipin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403931-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- mucolipin 1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase mucolipin 1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase mucolipin 1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MCOLN1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:mucolipin 1 Anticorpo (F-10): sc-398868
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
mucolipin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403931-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
mucolipin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403931-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MCOLN1 codifica a mucolipina 1 (TRPML1), um canal catiônico endolisossomal permeável a Ca²⁺ que regula o tráfego de membranas, a reforma de lisossomos e o fluxo autofagia–lisossomo. A liberação de Ca²⁺ mediada por TRPML1 coordena eventos de fusão/fissão de vesículas e influencia a homeostase iônica lisossomal, afetando vias de detecção de nutrientes e de adaptação ao estresse, incluindo a sinalização do mTORC1. A disfunção de MCOLN1 perturba o processamento de cargas endocíticas e os mecanismos celulares de depuração, conectando a alteração da função lisossomal à neurodegeneração e à biologia mais ampla das doenças de armazenamento lisossomal. Como regulador nodal do controle de qualidade de organelas, MCOLN1 é frequentemente estudado em modelos de defeitos no tráfego intracelular, respostas ao estresse oxidativo e sinalização imune inata.
mucolipin 1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MCOLN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MCOLN1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MCOLN1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MCOLN1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.