Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (m) Mucin 5AC/MUC5AC: sc-421752-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Mucin 5AC/MUC5AC correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Mucin 5AC/MUC5AC Double Nickase (m) et le plasmide Mucin 5AC/MUC5AC Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Muc5ac. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Mucin 5AC/MUC5AC Antibody (45M1): sc-21701
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Mucin 5AC/MUC5AC | sc-421752-NIC | 20 µg | $410.00 |
Muc5ac code la mucine formant un gel Mucin 5AC/MUC5AC, une glycoprotéine sécrétée fortement O‑glycosylée qui constitue un composant structural majeur de la barrière de mucus des voies aériennes et du tractus gastro-intestinal dans les épithéliums de la souris. Son expression régulée soutient la clairance mucociliaire, l’hydratation épithéliale et la défense innée en modulant les propriétés viscoélastiques du mucus et en limitant le contact des agents pathogènes avec la surface cellulaire. Muc5ac est induit au cours de la différenciation épithéliale et du remodelage inflammatoire via des programmes sensibles aux cytokines et au stress, notamment la signalisation EGFR/MAPK et la métaplasie des cellules caliciformes induite par l’axe IL‑13–STAT6. Une production dérégulée de Muc5ac et une glycosylation des mucines altérée sont associées à l’obstruction muqueuse et à l’inflammation chronique dans des modèles de maladies respiratoires, ainsi qu’à des modifications de la barrière épithéliale dans des pathologies gastro-intestinales, ce qui en fait un marqueur fréquemment utilisé dans les études d’hypersécrétion des voies aériennes et d’immunité muqueuse.
Mucin 5AC/MUC5AC Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Muc5ac dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Muc5ac. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Muc5ac. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Muc5ac.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.