Plasmide Double Nickase (m) MS4A7: sc-430914-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) MS4A7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MS4A7 Double Nickase (m) et le plasmide MS4A7 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ms4a7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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Plasmide Double Nickase (m) MS4A7 | sc-430914-NIC | 20 µg | $410.00 |
Ms4a7 code MS4A7, une protéine membranaire tétraspan enrichie dans les monocytes et les macrophages, et fréquemment utilisée comme marqueur de la différenciation myéloïde. MS4A7 intervient dans l’organisation des microdomaines de la membrane plasmique et dans la régulation de la signalisation des récepteurs immunitaires, influençant des processus tels que la phagocytose, la migration et l’activation inflammatoire. Dans les tissus de souris et les microenvironnements tumoraux, l’expression de Ms4a7 est corrélée à l’infiltration des macrophages et à leur polarisation fonctionnelle, ce qui la relie à des réseaux d’immunité innée incluant la signalisation des cytokines et des chimiokines. Des états myéloïdes altérés marqués par MS4A7 ont été associés à des pathologies inflammatoires et à la biologie des macrophages associés aux cancers, faisant de Ms4a7 un nœud utile pour disséquer les programmes des cellules immunitaires.
MS4A7 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ms4a7 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ms4a7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ms4a7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ms4a7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.