MOS Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406911

Descripción general

El MOS humano codifica Mos, una cinasa de proteínas de serina/treonina conocida principalmente por su papel en el control del ciclo celular meiótico mediante la activación de la cascada MAPK/ERK. Mos actúa aguas arriba de MEK1/2 y ERK1/2, ayudando a coordinar la actividad del factor citostático, la dinámica del huso y la progresión a través de la fase M en contextos de células germinales, y se ha utilizado como regulador modelo de la retroalimentación en la señalización MAPK. La desregulación de la expresión de MOS o de su actividad cinasa se ha vinculado a alteraciones de la señalización proliferativa y a fenotipos similares a la transformación en sistemas experimentales, lo que respalda su relevancia para estudiar el cableado de la vía MAPK y los puntos de control del ciclo celular. Estas propiedades hacen de MOS una diana útil para investigar redes de señalización impulsadas por cinasas y sus efectos transcripcionales y citoesqueléticos aguas abajo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MOS (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MOS en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MOS junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MOS tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MOS.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MOS para la investigación de la señalización de MOS, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MOS críticos para la función de MOS
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MOS para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MOS CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MOS CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MOS. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MOS (h) y el plásmido HDR MOS (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MOS para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MOS definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.