MORF Double Nickase Plasmid (h): sc-418605-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MORF Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MORF Double-Nickase-Plasmid (h) und MORF Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf KAT6B abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MORF Double Nickase Plasmid (h) | sc-418605-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MORF Double Nickase Plasmid (h2) | sc-418605-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KAT6B kodiert die humane Lysin-Acetyltransferase MORF (auch bekannt als MYST4), eine nukleäre Histon-Acetyltransferase, die Chromatin modifiziert, um Transkriptionsprogramme zu regulieren, welche Zellschicksalsentscheidungen, Proliferation und Differenzierung steuern. MORF wirkt in multiproteinären chromatinmodifizierenden Komplexen und trägt zur Acetylierung von Histonen wie H3 bei, wodurch die Zugänglichkeit von Promotoren und Enhancern in Entwicklungs‑Gen-Netzwerken geprägt wird. Die KAT6B-Aktivität ist mit der epigenetischen Regulation der Linienfestlegung sowie DNA‑templatierten Prozessen einschließlich Transkriptionsinitiation und ‑elongation verknüpft. Eine fehlregulierte Funktion und Dosierung von KAT6B/MORF steht mit Entwicklungssydromen und krebsassoziierter transkriptioneller Reprogrammierung in Zusammenhang und macht KAT6B zu einem wichtigen Ziel für die Untersuchung chromatingesteuerter Mechanismen der Krankheitsbiologie.
MORF Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des KAT6B-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von KAT6B abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die KAT6B-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit KAT6B-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.