MMTAG2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-413147-LAC

C1orf35 kodiert das humane Protein MMTAG2, einen bislang nur unzureichend charakterisierten Faktor mit zunehmenden Hinweisen auf eine Rolle in der Organisation des Zellkerns und der transkriptionellen Regulation. Verfügbare funktionelle Genomik-Datensätze deuten darauf hin, dass MMTAG2 Genexpressionsprogramme beeinflussen könnte, die Zellzustandsübergänge koordinieren, mit möglichem Einfluss auf Proliferations- und Stressantwort-Signalwege. Veränderte Expressionsmuster von C1orf35 wurden in unterschiedlichen Tumortypen und in Perturbations-Screens beschrieben, was seine Einordnung als kontextabhängiger Modulator der zellulären Fitness eher denn als kanonischer Treiber stützt. Die Definition MMTAG2-abhängiger Netzwerke kann dazu beitragen, zu klären, wie chromatinassoziierte Prozesse die Linienidentität und krankheitsrelevante Phänotypen prägen.

MMTAG2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente C1orf35-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

MMTAG2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der C1orf35-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen MMTAG2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen C1orf35-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.