MLF1IP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413208
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MLF1IP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MLF1IP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MLF1IP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-413208 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CENPU codifica a proteína centromérica U (MLF1IP), um componente central do complexo CENP-O/P/Q/U, necessário para a montagem adequada do cinetócoro e para a ligação estável aos microtúbulos durante a mitose. A MLF1IP favorece o alinhamento (congressão) e a segregação precisos dos cromossomos, ajudando a manter a estabilidade genômica por meio da progressão ordenada do ciclo celular e de processos associados ao checkpoint do fuso. A interrupção ou desregulação de fatores do centromero/cinetócoro pode levar à segregação incorreta de cromossomos e à aneuploidia, relacionando a função de CENPU a mecanismos comumente associados a fenótipos de doenças proliferativas. Como regulador mitótico, CENPU é frequentemente estudado no contexto do controle da divisão celular, de vias de instabilidade cromossômica e da remodelação do ciclo celular relacionada ao câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MLF1IP (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CENPU em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CENPU, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CENPU na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MLF1IP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CENPU para a investigação da sinalização de MLF1IP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CENPU críticos para a função MLF1IP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CENPU para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MLF1IP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MLF1IP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CENPU. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MLF1IP Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MLF1IP (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CENPU para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CENPU definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.