Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
MIS Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400715-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MISO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MIS (h) e o Plasmídeo Double Nickase MIS (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AMH. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MIS Anticorpo (B-11): sc-166752
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MIS Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400715-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MIS Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400715-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O hormônio anti-mülleriano (AMH), também conhecido como substância inibidora mülleriana (MIS), é uma glicoproteína da superfamília TGF-β que sinaliza por meio do AMHR2 em conjunto com receptores do tipo I para ativar programas transcricionais dependentes de SMAD1/5/8. Em humanos, o AMH/MIS regula processos-chave do desenvolvimento e da reprodução, incluindo a regressão dos ductos de Müller no embrião masculino e a modulação da foliculogênese e da reserva ovariana em mulheres. Sua sinalização se intersecciona com a regulação mais ampla, pela via BMP/TGF-β, de decisões de destino celular, proliferação e diferenciação em tecidos reprodutivos. A expressão desregulada de AMH ou defeitos na via do receptor têm sido associados a distúrbios do desenvolvimento sexual e a fenótipos de endocrinologia reprodutiva, e alterações na atividade da via de AMH vêm sendo investigadas em contextos de doenças gonadais e do trato reprodutivo.
MIS O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AMH em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AMH. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AMH. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AMH interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.