Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
MIS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400715
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MIS O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MIS, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MIS Anticorpo (B-11): sc-166752
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MIS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400715 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O hormônio anti-Mülleriano (AMH), também conhecido como substância inibidora mülleriana (MIS), é uma glicoproteína da superfamília TGF-β que sinaliza principalmente por meio do AMHR2 e, a jusante, de SMAD1/5/8, para regular o desenvolvimento do trato reprodutivo e a função gonadal. No ovário, o AMH produzido pelas células da granulosa modula o recrutamento folicular e a responsividade ao FSH, moldando o equilíbrio entre crescimento folicular e quiescência. No testículo, a MIS produzida pelas células de Sertoli promove a regressão dos ductos de Müller durante a diferenciação sexual masculina. A sinalização AMH/MIS desregulada e a expressão alterada são estudadas em distúrbios do desenvolvimento sexual, na fisiologia ovariana e na biologia tumoral relacionada ao sistema endócrino.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MIS (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene AMH em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do AMH, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do AMH na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MIS.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de AMH para a investigação da sinalização de MIS, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) AMH críticos para a função MIS
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos AMH para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MIS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MIS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus AMH. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MIS Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MIS (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia AMH para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo AMH definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.