Plasmide Double Nickase (h) Mig12: sc-412921-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Mig12 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Mig12 Double Nickase (h) et le plasmide Mig12 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MID1IP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Mig12 | sc-412921-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Mig12 | sc-412921-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MID1IP1 code Mig12, un régulateur cytosolique du métabolisme lipidique qui interagit avec l’acétyl‑CoA carboxylase (ACC) afin de moduler la production de malonyl‑CoA et la synthèse de novo des acides gras. En influençant l’activité de l’ACC, Mig12 participe à des programmes métaboliques qui affectent la biogenèse membranaire, le stockage d’énergie et la signalisation sensible aux nutriments liée à la lipogenèse. Une expression altérée de MID1IP1 a été associée à la reprogrammation métabolique observée dans l’obésité, la résistance à l’insuline et les états de stress cellulaire induits par les lipides, ce qui en fait une cible pertinente pour les études de biologie des maladies métaboliques. Cette cible présente également un intérêt dans les systèmes où le flux lipogénique soutient la prolifération et la survie, permettant d’explorer les vulnérabilités métaboliques sur le plan mécanistique.
Mig12 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MID1IP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MID1IP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MID1IP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MID1IP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.