Plasmide CRISPR/Cas9 KO Metaxin 3 (h): sc-415611

Présentation

MTX3 code la métaxine 3, un membre de la famille des métaxines impliquée dans la biologie mitochondriale, notamment l’organisation de la membrane mitochondriale externe et la biogenèse des complexes d’importation des protéines mitochondriales. Les métaxines sont associées à des processus tels que le trafic des protéines mitochondriales, le maintien de l’intégrité mitochondriale et la coordination du métabolisme avec les réponses au stress. Une homéostasie mitochondriale altérée est une caractéristique fréquente dans des contextes pathologiques variés, faisant de MTX3 un locus utile pour étudier les mécanismes reliant la dynamique mitochondriale à la survie et à la différenciation cellulaires. L’étude fonctionnelle de MTX3 peut aider à préciser comment les voies d’import mitochondrial influencent la signalisation en aval et les programmes cellulaires dépendants de l’énergie.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Metaxin 3 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène MTX3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du MTX3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert MTX3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Metaxin 3.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en MTX3 pour l'étude de la signalisation de Metaxin 3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de MTX3 essentiels à la fonction de Metaxin 3
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de MTX3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Metaxin 3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Metaxin 3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus MTX3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Metaxin 3 plasmide HDR (h) et le Metaxin 3 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie MTX3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles MTX3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.