Partículas Lentivirales de Activación (h) MCT9: sc-409073-LAC

SLC16A9 codifica el transportador de monocarboxilatos 9 (MCT9), un transportador de membrana multipaso de la familia de transportadores de solutos 16 que contribuye al movimiento transmembrana de pequeños aniones orgánicos y metabolitos relacionados. Al modular el flujo de metabolitos a nivel celular y epitelial, MCT9 es relevante para la homeostasis metabólica y para procesos de transporte que influyen en el manejo de nutrientes y en la disposición de xenobióticos. Estudios genéticos y funcionales han vinculado la actividad de SLC16A9 con variaciones en el urato circulante y otros rasgos metabólicos, lo que respalda su uso en investigación mecanística sobre el metabolismo renal y sistémico. Investigar la expresión y la función de MCT9 ayuda a esclarecer cómo las redes de transportadores modulan la disponibilidad de metabolitos, la señalización y las respuestas al estrés en distintos tejidos.

Las partículas de activación lentiviral MCT9 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de SLC16A9 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral MCT9 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción SLC16A9, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de MCT9. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo SLC16A9 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.