Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO MCM2 (h): sc-400959
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- MCM2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique MCM2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MCM2 Antibody (E-8): sc-373702
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO MCM2 (h) | sc-400959 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
MCM2 (minichromosome maintenance complex component 2) est une ATPase AAA+ essentielle au sein de l’hélicase MCM2–7, qui autorise l’activation des origines de réplication et assure le déroulement de l’ADN pendant la phase S. En coordonnant le déclenchement des origines, la progression des fourches de réplication et les réponses des points de contrôle, MCM2 contribue au maintien de la stabilité du génome et au déroulement ordonné du cycle cellulaire lors du passage de G1 à S. Une expression dérégulée de MCM2 ou un défaut d’autorisation de la réplication peuvent favoriser le stress réplicatif, l’activation de la signalisation des dommages à l’ADN et l’instabilité chromosomique, des processus fréquemment étudiés en biologie du cancer et dans les troubles prolifératifs. En tant que facteur central du replisome, MCM2 est également étudiée dans le contexte des voies de stress réplicatif dépendantes d’ATR/CHK1 et des réponses aux agressions génotoxiques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO MCM2 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène MCM2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du MCM2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert MCM2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine MCM2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en MCM2 pour l'étude de la signalisation de MCM2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de MCM2 essentiels à la fonction de MCM2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de MCM2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le MCM2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le MCM2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus MCM2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le MCM2 plasmide HDR (h) et le MCM2 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie MCM2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles MCM2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.