Plasmide Double Nickase (h) Matrilin-2: sc-404852-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Matrilin-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Matrilin-2 Double Nickase (h) et le plasmide Matrilin-2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MATN2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Matrilin-2 Antibody (2B8): sc-293397
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Matrilin-2 | sc-404852-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Matrilin-2 | sc-404852-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MATN2 code la matriline‑2, une protéine adaptatrice oligomérique de la matrice extracellulaire, qui relie les collagènes, les protéoglycanes et d’autres composants matriciels afin de soutenir l’architecture tissulaire et la signalisation cellule–matrice. La matriline‑2 contribue à l’organisation de la membrane basale et de la matrice interstitielle et influence des processus tels que l’adhérence cellulaire, la migration et la réparation des plaies, via la modulation du remodelage de la matrice extracellulaire. Une expression altérée de MATN2 ou son incorporation dans la matrice a été associée à un remodelage fibrotique et à des microenvironnements inflammatoires, reliant la biologie de la matriline‑2 à l’homéostasie des tissus conjonctifs et aux réponses au stress. En tant que facteur associé à la matrice, MATN2 est pertinent pour les études de la mécanotransduction et des voies de la matrice extracellulaire qui régulent l’intégrité des tissus.
Matrilin-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MATN2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MATN2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MATN2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MATN2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.