MAML2 Double Nickase Plasmid (m): sc-435408-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MAML2 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MAML2 Double-Nickase-Plasmid (m) und MAML2 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Maml2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MAML2 Double Nickase Plasmid (m) | sc-435408-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MAML2 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-435408-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das Mausgen **Maml2** kodiert mastermind-like 2 (MAML2), einen transkriptionellen Koaktivator, der mit **NICD–CSL/RBPJ**-Komplexen zusammenwirkt, um Notch-abhängige Genexpressionsprogramme anzutreiben, die Zellschicksalsentscheidungen, Differenzierung und Gewebehomöostase steuern. MAML2 integriert Signaleingänge an Zielpromotoren, um transkriptionelle Outputs zu modulieren, die in verschiedenen Kontexten Proliferation und Linienfestlegung beeinflussen. Eine dysregulierte Notch–MAML-Transkriptionsaktivität wurde mit Entwicklungsanomalien und krebsassoziierter Umprogrammierung der Transkription in Verbindung gebracht, was MAML2 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung des Signalwegs in vivo und in vitro macht. In Mausmodellen ermöglicht die Manipulation von **Maml2** mechanistische Studien zur Notch-Transkriptionsregulation, zur Epistase mit anderen Signalwegkomponenten sowie zu Effekten auf nachgeschaltete Gennetzwerke.
MAML2 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Maml2-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Maml2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Maml2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Maml2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.