MALL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406302

Visão geral

MAL like (MALL) codifica uma proteína de membrana tetraspan enriquecida em microdomínios de membrana ricos em colesterol e esfingolipídios, onde ajuda a organizar o tráfego apical e a compartimentalização da membrana em células epiteliais. Por meio de efeitos sobre a arquitetura das lipid rafts, a MALL pode influenciar a reciclagem endocítica, o transporte vesicular e a distribuição espacial de complexos de sinalização na membrana plasmática. Alterações na expressão de MALL foram observadas em múltiplos tipos tumorais e vêm sendo estudadas em relação ao estado de diferenciação epitelial, à polaridade celular e ao comportamento de sinalização dependente de microdomínios. Essas propriedades tornam a MALL relevante para investigar mecanismos de organização de membrana que modulam proliferação, adesão e dinâmica de receptores em modelos celulares humanos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MALL (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MALL em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MALL, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MALL na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MALL.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MALL para a investigação da sinalização de MALL, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MALL críticos para a função MALL
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MALL para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MALL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MALL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MALL. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MALL Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MALL (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MALL para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MALL definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.