Plasmide Double Nickase (h) MAGE-A4: sc-403486-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MAGE-A4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MAGE-A4 Double Nickase (h) et le plasmide MAGE-A4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MAGEA4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MAGE-A4 | sc-403486-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MAGE-A4 | sc-403486-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAGEA4 code pour MAGE-A4, un antigène cancer-testis normalement enrichi dans les cellules germinales mais exprimé de façon aberrante dans de multiples contextes tumoraux, ce qui en fait un marqueur utile pour étudier la restriction de lignée et la réactivation épigénétique. MAGE-A4 est impliqué dans des réseaux d’interactions protéine–protéine pouvant influencer la protéostasie dépendante de l’ubiquitine, la régulation transcriptionnelle et les réponses au stress cellulaire, notamment des voies liées à l’apoptose et à la reconnaissance immunitaire. Son expression est fréquemment associée à des états de chromatine altérés et à des dynamiques de méthylation de l’ADN, offrant un modèle pour l’étude de la dérépression transcriptionnelle et de la biologie de la présentation antigénique. En recherche biomédicale, MAGEA4 est couramment étudié en lien avec la fitness des cellules tumorales, les paysages d’antigènes ciblables par le système immunitaire et les mécanismes contrôlant l’expression des gènes cancer-testis.
MAGE-A4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAGEA4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAGEA4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAGEA4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAGEA4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.