Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (m) MAD2B: sc-428124-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) MAD2B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MAD2B Double Nickase (m) et le plasmide MAD2B Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Mad2l2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MAD2B Antibody (14): sc-135977
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) MAD2B | sc-428124-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) MAD2B | sc-428124-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mad2l2 (MAD2B/REV7) code une protéine à domaine HORMA qui contribue au maintien du génome en coordonnant la tolérance aux dommages de l’ADN et le choix des voies de réparation. Dans les cellules de mammifères, MAD2B est une sous-unité clé de la polymérase ζ, soutenant la synthèse translésionnelle de l’ADN, et participe également à la régulation de la réparation des cassures double brin via des interactions avec des facteurs qui influencent la résection des extrémités et la sélection des voies. Au-delà de la réparation, MAD2B a été associé au contrôle du cycle cellulaire et à des processus liés au point de contrôle mitotique via des interactions avec des régulateurs de l’APC/C, reliant les réponses au stress réplicatif à la signalisation proliférative. Le dérèglement des réseaux de réparation et de points de contrôle dépendants de MAD2B est pertinent pour comprendre les mécanismes à l’origine de l’instabilité génomique, une caractéristique majeure étudiée en biologie des cancers et dans d’autres troubles de l’intégrité du génome.
MAD2B Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Mad2l2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Mad2l2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Mad2l2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Mad2l2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.