Plasmide Double Nickase (h) Ly6G5c: sc-413393-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Ly6G5c correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Ly6G5c Double Nickase (h) et le plasmide Ly6G5c Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LY6G5C. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Ly6G5c | sc-413393-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Ly6G5c | sc-413393-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LY6G5C code la protéine Ly6G5c, membre de la superfamille Ly6/uPAR de petites protéines riches en cystéines, fréquemment associées à des contextes de signalisation à la surface cellulaire ou sécrétés. Le gène se situe dans la région du CMH (MHC) de classe III sur le chromosome 6, ce qui le relie à des voisinages génomiques enrichis en régulateurs immunitaires et inflammatoires. Bien que Ly6G5c soit moins bien caractérisée que d’autres protéines de la famille Ly6, les profils d’expression rapportés et ce lien régional suggèrent une implication potentielle dans la communication entre cellules immunitaires, les interactions épithélio-immunitaires et la modulation des réseaux de signalisation inflammatoire. Des variations génétiques et une expression dérégulée au sein du locus du CMH ont été associées à une susceptibilité accrue aux maladies auto-immunes et inflammatoires, ce qui fait de LY6G5C un gène pertinent pour des études mécanistiques des phénotypes liés à l’immunité.
Ly6G5c Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LY6G5C dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LY6G5C. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LY6G5C. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LY6G5C.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.