Plasmide Double Nickase (m) LXR alpha/NR1H3: sc-423616-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) LXR alpha/NR1H3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LXR alpha/NR1H3 Double Nickase (m) et le plasmide LXR alpha/NR1H3 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Nr1h3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) LXR alpha/NR1H3 | sc-423616-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) LXR alpha/NR1H3 | sc-423616-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Nr1h3 code le récepteur X du foie alpha (LXRα/NR1H3), un récepteur nucléaire activé par un ligand qui hétérodimérise avec RXR afin de réguler des programmes transcriptionnels contrôlant l’efflux du cholestérol, le métabolisme des acides biliaires et la synthèse des acides gras. LXRα intègre la détection des oxystérols à la gestion des lipoprotéines en modulant des cibles impliquées dans le transport inverse du cholestérol et l’homéostasie des stérols, et il interfère avec la signalisation inflammatoire dans les macrophages via des mécanismes de transrépression. Dans des modèles murins, la modulation de l’activité de Nr1h3 a été utilisée pour étudier la dyslipidémie, la biologie des cellules spumeuses pertinente pour l’athérosclérose, la stéatose hépatique et l’inflammation métabolique. Ces fonctions font de NR1H3 un nœud clé pour explorer le dialogue immunométabolique entre le foie, le tissu adipeux et les compartiments de l’immunité innée.
LXR alpha/NR1H3 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nr1h3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nr1h3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nr1h3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nr1h3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.