LRRN3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421473

Übersicht

Lrrn3 kodiert das leucinreiche Repeat-Neuronenprotein 3 (LRRN3), ein Typ‑I‑Transmembranprotein, das in neuralen Geweben angereichert ist und mit Zell‑Zell‑Erkennung, Neuritenauswuchs und synapsenassoziierter Signalübertragung in Verbindung gebracht wird. Über seine extrazellulären LRR‑Domänen trägt LRRN3 vermutlich zu adhäsionsähnlichen Prozessen und zur Koordination neuronaler Differenzierungsprogramme bei und beeinflusst damit Netzwerkbildung und Plastizität. Expressionsmuster verknüpfen LRRN3 außerdem mit Zuständen von Immunzellen; dort wird es als Marker für die T‑Zell‑Reifung und funktionelle Erschöpfung verwendet, was auf Rollen bei aktivierungsassoziiertem transkriptionellem Remodeling hindeutet. Eine dysregulierte Lrrn3‑Expression wurde in neuroentwicklungsbezogenen und neurodegenerationsnahen Kontexten sowie in immunonkologischen Datensätzen beschrieben, was seine Eignung für mechanistische Studien zur neuralen und immunologischen Signalgebung unterstützt.

Das LRRN3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Lrrn3-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Lrrn3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Lrrn3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die LRRN3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Lrrn3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der LRRN3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Lrrn3-Exone abzielen, die für die LRRN3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Lrrn3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom LRRN3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom LRRN3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Lrrn3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das LRRN3 HDR-Plasmid (m) und LRRN3 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Lrrn3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Lrrn3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.