LRP6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400844

Visão geral

LRP6 (proteína relacionada ao receptor de lipoproteína de baixa densidade 6) é um correceptor transmembrana de passagem única essencial para a sinalização canônica Wnt/β-catenina, formando complexos induzidos por ligante com receptores Frizzled para promover o recrutamento de Dishevelled e a inibição do complexo de destruição da β-catenina. Por meio dessa via, a LRP6 regula o padrão embrionário, a manutenção de células-tronco, a proliferação e a diferenciação celular, e pode integrar sinais de antagonistas extracelulares como DKK e esclerostina, que modulam a disponibilidade do receptor. Alterações na atividade ou na expressão de LRP6 têm sido associadas à sinalização Wnt desregulada observada em diversos contextos, incluindo biologia do câncer, fenótipos ósseos e metabólicos e processos do neurodesenvolvimento. Como um nó de sinalização próximo à membrana, a LRP6 é frequentemente investigada para dissecar o tráfego de receptores, a montagem do sinalossoma e a comunicação cruzada entre vias que afeta programas transcricionais a jusante da β-catenina.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LRP6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LRP6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LRP6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LRP6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LRP6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LRP6 para a investigação da sinalização de LRP6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LRP6 críticos para a função LRP6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LRP6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo LRP6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LRP6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LRP6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo LRP6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LRP6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LRP6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LRP6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.