LPLUNC3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406344

Übersicht

BPIFB3 (LPLUNC3) ist ein sezerniertes Mitglied der Familie der BPI-Fold-enthaltenden Proteine, die in mukosalen Epithelien angereichert ist. Dort wird angenommen, dass es zur angeborenen Abwehr an den Oberflächen der Atemwege sowie des oberen aerodigestiven Trakts beiträgt. Proteine dieser Familie interagieren mit mikrobenassoziierten Lipiden und können die Homöostase der epithelialen Barriere mitgestalten, indem sie inflammatorische Signalwege und antimikrobielle Antworten beeinflussen. Die BPIFB3-Expression reagiert auf Umwelt- und Entzündungsreize und wurde mit der Regulation epithelialer Differenzierungsprogramme sowie mit Wirt–Mikroben-Interaktionen in Verbindung gebracht. Veränderte BPIFB3/LPLUNC3-Spiegel wurden in verschiedenen entzündlichen Zuständen der Atemwege und epithelial-assoziierten Pathologien beschrieben, was seinen Nutzen als Marker und als mechanistisch relevanten Knotenpunkt in der Forschung zur mukosalen Biologie unterstreicht.

Das LPLUNC3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des BPIFB3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des BPIFB3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von BPIFB3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die LPLUNC3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von BPIFB3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der LPLUNC3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf BPIFB3-Exone abzielen, die für die LPLUNC3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere BPIFB3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom LPLUNC3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom LPLUNC3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des BPIFB3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das LPLUNC3 HDR-Plasmid (h) und LPLUNC3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von BPIFB3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten BPIFB3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.