LPAAT-β Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405045-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LPAAT-βO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LPAAT-β (h) e o Plasmídeo Double Nickase LPAAT-β (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AGPAT2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LPAAT-β Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405045-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LPAAT-β Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405045-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AGPAT2 codifica a aciltransferase-β de ácido lisofosfatídico (LPAAT-β), uma enzima associada ao retículo endoplasmático que catalisa a acilação do ácido lisofosfatídico em ácido fosfatídico, um intermediário central na biossíntese de glicerofosfolipídios e triacilgliceróis. Ao controlar a disponibilidade de ácido fosfatídico, a LPAAT-β influencia a biogênese de membranas, a formação de gotículas lipídicas e nós de sinalização lipídica que se conectam à remodelação de fosfolipídios e às vias de armazenamento de energia. A atividade de AGPAT2 está intimamente ligada à homeostase lipídica dos adipócitos e a uma regulação metabólica mais ampla, e a desregulação dessa via está associada a fenótipos graves de lipodistrofia e a disfunções metabólicas relacionadas à resistência à insulina. Por isso, AGPAT2 é frequentemente estudado em contextos de adipogênese, fluxo lipídico entre organelas e regulação, mediada por lipídios, de respostas celulares ao estresse.
LPAAT-β O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AGPAT2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AGPAT2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AGPAT2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AGPAT2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.