Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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LOXL4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426632
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LOXL4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LOXL4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LOXL4 Anticorpo (B-6): sc-365822
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LOXL4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426632 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Loxl4 codifica a lisil oxidase-like 4 (LOXL4), uma amina oxidase dependente de cobre que catalisa a desaminação oxidativa de resíduos de lisina no colágeno e na elastina, promovendo a reticulação covalente e a estabilização da matriz extracelular (MEC). Por meio do remodelamento da MEC, a LOXL4 influencia programas de adesão celular, migração e mecanotransdução ligados ao desenvolvimento e ao reparo tecidual. Alterações na atividade da família LOXL têm sido associadas ao remodelamento fibrótico e a mudanças na arquitetura do microambiente tumoral, tornando o Loxl4 relevante para o estudo da regulação da inflamação, da biologia vascular e das dinâmicas epitélio–mesenquimais mediadas pela MEC. Em sistemas murinos, a perturbação de Loxl4 dá suporte a estudos mecanísticos sobre a homeostase do tecido conjuntivo e vias de sinalização dependentes da matriz.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LOXL4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Loxl4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Loxl4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Loxl4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LOXL4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Loxl4 para a investigação da sinalização de LOXL4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Loxl4 críticos para a função LOXL4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Loxl4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LOXL4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo LOXL4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Loxl4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LOXL4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR LOXL4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Loxl4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Loxl4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.