Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO LOX (m): sc-421456
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- LOX Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique LOX, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LOX Antibody (F-8): sc-373995
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO LOX (m) | sc-421456 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin **Lox** code la lysyl‑oxydase (LOX), une amine‑oxydase sécrétée dépendante du cuivre qui catalyse la réticulation covalente du collagène et de l’élastine, contrôlant ainsi la maturation de la matrice extracellulaire (MEC) et l’intégrité biomécanique des tissus. L’activité de LOX façonne le remodelage de la MEC, régule l’adhérence et la migration cellule–matrice, et influence des circuits de signalisation liés à la fibrose et à la mécanotransduction, notamment les voies intégrine/FAK et MAPK en aval. Une expression ou une activité de LOX dérégulée est associée à une rigidification et à un remodelage anormaux de la matrice observés dans les affections fibrosantes, les pathologies vasculaires et les modifications du stroma associées aux tumeurs, faisant de **Lox** une cible utile pour étudier les phénotypes induits par le microenvironnement.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO LOX (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Lox dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Lox, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Lox à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine LOX.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Lox pour l'étude de la signalisation de LOX, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Lox essentiels à la fonction de LOX
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Lox pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le LOX plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le LOX plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Lox. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le LOX plasmide HDR (m) et le LOX (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Lox pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Lox définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.