Plásmido Doble Nickase (m) LONP1: sc-428748-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)LONP1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LONP1 (m) y el plásmido de doble nickasa LONP1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Lonp1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) LONP1 | sc-428748-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) LONP1 | sc-428748-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Lonp1 codifica LONP1, una proteasa/chaperona de serina dependiente de ATP localizada en la matriz mitocondrial que regula la proteostasis mitocondrial al replegar o degradar proteínas dañadas, mal plegadas y oxidadas. Al controlar el recambio de componentes de la cadena respiratoria y de factores reguladores, LONP1 favorece la fosforilación oxidativa, el mantenimiento del ADN mitocondrial y programas adaptativos al estrés como la respuesta a proteínas mal plegadas mitocondriales. La alteración de la función de LONP1 perturba la dinámica mitocondrial, eleva las especies reactivas de oxígeno y compromete la homeostasis bioenergética, vinculando esta vía con fenotipos de disfunción mitocondrial relevantes para la neurodegeneración, el estrés cardiometabólico y la remodelación metabólica asociada al cáncer. Por lo tanto, Lonp1 en ratón es un nodo clave para estudiar mecanismos de control de calidad que integran la proteólisis, la remodelación dependiente de ATP y la señalización redox en las mitocondrias.
LONP1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Lonp1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Lonp1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Lonp1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Lonp1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.