LOC729991-MEF2B Double Nickase Plasmid (h): sc-405289-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das LOC729991-MEF2B Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- LOC729991-MEF2B Double-Nickase-Plasmid (h) und LOC729991-MEF2B Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf BORCS8-MEF2B abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
LOC729991-MEF2B Double Nickase Plasmid (h) | sc-405289-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LOC729991-MEF2B Double Nickase Plasmid (h2) | sc-405289-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BORCS8-MEF2B kodiert ein chimäres BORCS8–MEF2B-Proteinprodukt (LOC729991-MEF2B), das eine Komponente des BORC-Komplexes, der die Positionierung von Lysosomen und den kinesinvermittelten Transport reguliert, mit MEF2B verbindet, einem MADS-Box-Transkriptionsfaktor, der an der aktivitätsabhängigen Genregulation beteiligt ist. Die Signalübertragung der MEF2-Familie integriert Calcium-/MAPK-Signale, um Transkriptionsprogramme zu steuern, die Proliferation, Differenzierung und Stressantworten regulieren, während BORC-assoziierter Transport Autophagie und endolysosomale Homöostase beeinflusst. Eine Fehlregulation von MEF2B wurde mit veränderter transkriptioneller Kontrolle in der lymphatischen Biologie in Verbindung gebracht, einschließlich wiederkehrender genomischer Veränderungen, die bei B‑Zell-Malignomen beschrieben wurden, wodurch dieser Lokus für die Untersuchung der Wechselwirkungen zwischen Transkription und intrazellulärem Transport in krankheitsrelevanten Zellkontexten von Bedeutung ist.
LOC729991-MEF2B Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des BORCS8-MEF2B-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von BORCS8-MEF2B abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die BORCS8-MEF2B-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit BORCS8-MEF2B-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.