LHX3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404482
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- LHX3 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico LHX3, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: LHX3 Anticuerpo (2C10): sc-293411
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
LHX3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404482 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
LHX3 (LIM homeobox 3) codifica un factor de transcripción con homeodominio y dominio LIM que coordina la especificación de linaje y los programas de diferenciación terminal durante la embriogénesis. En la hipófisis y el sistema nervioso, LHX3 regula redes transcripcionales que controlan el destino de células productoras de hormonas y el desarrollo de neuronas motoras mediante la unión al ADN dependiente de secuencia y el reclutamiento de cofactores. La alteración de la regulación génica dependiente de LHX3 perturba las vías del desarrollo que rigen la organogénesis de la hipófisis anterior y la conectividad neuronal. La evidencia genética en humanos vincula una función alterada de LHX3 con la deficiencia combinada de hormonas hipofisarias, con fenotipos neurodeliberativos variables, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar el control transcripcional del desarrollo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO LHX3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen LHX3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del LHX3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de LHX3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LHX3.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en LHX3 para la investigación de la señalización de LHX3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de LHX3 críticos para la función de LHX3
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de LHX3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido LHX3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido LHX3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus LHX3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LHX3 (h) y el plásmido HDR LHX3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología LHX3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana LHX3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.