Plasmide Double Nickase (h) LHPP: sc-408945-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LHPP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LHPP Double Nickase (h) et le plasmide LHPP Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LHPP. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LHPP Antibody (B-2): sc-376648
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LHPP | sc-408945-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LHPP | sc-408945-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LHPP (phosphatase du pyrophosphate inorganique de la phospholysine/phosphohistidine) est une phosphatase à histidine impliquée dans la régulation de la phosphorylation des histidines protéiques, une modification post-traductionnelle émergente qui influence la signalisation métabolique et les voies de réponse au stress. Dans les cellules humaines, l’activité de LHPP a été associée au contrôle de réseaux de transduction du signal dépendants de la phosphorylation, pouvant affecter la prolifération, la différenciation et l’homéostasie cellulaire. Des altérations de l’expression ou de la fonction de LHPP ont été rapportées dans plusieurs contextes pathologiques, notamment en cancérologie et dans les dérégulations métaboliques, ce qui en fait un nœud mécanistique pertinent pour l’étude de phénotypes pilotés par la phosphorylation.
LHPP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LHPP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LHPP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LHPP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LHPP.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.