Plásmido Doble Nickase (h) LAPTM4B: sc-408254-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)LAPTM4B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LAPTM4B (h) y el plásmido de doble nickasa LAPTM4B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a LAPTM4B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) LAPTM4B | sc-408254-NIC | 20 µg | $410.00 |
LAPTM4B (proteína lisosomal transmembrana 4 beta) es una proteína de membrana lisosomal/endosomal de múltiples pases que regula el tráfico intracelular, la señalización asociada a los lisosomas y la dinámica de membrana. Participa en procesos de transporte endolisosomal que influyen en el recambio de receptores y en vías posteriores como PI3K/AKT y la homeostasis del eje autofagia-lisosoma, lo que afecta a las respuestas al estrés celular y a la detección de nutrientes. La alteración de la expresión de LAPTM4B se ha asociado con cambios en la proliferación, la invasión y el manejo de fármacos en múltiples contextos tumorales, lo que la convierte en una diana relevante para diseccionar mecanismos centrados en el lisosoma en modelos de enfermedad. En células humanas, LAPTM4B también se estudia por sus funciones en la organización vesicular y la modulación de las salidas de señalización de receptores internalizados.
LAPTM4B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus LAPTM4B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de LAPTM4B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de LAPTM4B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con LAPTM4B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.