LAIR-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403542

概要

LAIR1は、白血球関連免疫グロブリン様受容体1（LAIR-1）をコードしており、LAIR-1はT細胞、B細胞、NK細胞、単球、樹状細胞などを含む免疫細胞に広く発現する抑制性のコラーゲン受容体です。細胞外マトリックスのコラーゲンに結合すると、LAIR-1はITIMモチーフを介してSHP-1/2などのホスファターゼをリクルートしてシグナルを伝達し、抗原受容体およびFc受容体経路を減弱させることで、活性化、サイトカイン産生、細胞傷害活性を抑制します。このチェックポイント様の機能により、組織マトリックス由来のシグナルが免疫恒常性と結び付けられ、白血球のトラフィッキングや炎症の発動閾値にも影響を与えます。LAIR-1シグナルの制御異常は、自己免疫、慢性炎症、感染、腫瘍関連の免疫抑制における免疫制御の変化と関連していることが示されており、機構免疫学研究における有用な標的（ノード）となっています。

LAIR-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLAIR1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LAIR1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LAIR1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LAIR-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LAIR-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LAIR1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LAIR-1の機能に不可欠なLAIR1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LAIR1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LAIR-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLAIR-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LAIR1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LAIR-1 HDRプラスミド（h）および LAIR-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLAIR1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLAIR1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。