Date published: 2026-7-20

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La/SSB双切口酶质粒(h): sc-416582-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • La/SSB 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • La/SSB双切酶质粒(h)和La/SSB双切酶质粒(h2)编码针对SSB的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:La/SSB: sc-80656,通过WB, IF或者IHC分析
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    La/SSB双切口酶质粒(h)

    sc-416582-NIC
    20 µg
    $410.00

    La/SSB双切口酶质粒(h2)

    sc-416582-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    人类 SSB 基因编码 La/SSB RNA 结合磷酸蛋白,这是一种普遍存在的因子,可与 RNA 聚合酶 III 的转录产物结合,以保护新生 RNA 并促进其成熟。La/SSB 通过稳定前体 tRNA、U6 snRNA、5S rRNA 及其他小 RNA 参与 RNA 质量控制;同时,它还能通过与特定 mRNA 相互作用,在细胞应激条件下参与翻译调控。通过这些作用,SSB 将 RNA 代谢与核糖核蛋白复合体装配、应激反应以及蛋白质稳态维持等过程联系起来。针对 La/SSB 的自身抗体常见于系统性自身免疫性疾病(包括干燥综合征和系统性红斑狼疮),因此 La/SSB 也常被用作解析免疫相关 RNA–蛋白通路的分子抓手。

    La/SSB 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SSB 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SSB内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SSB的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SSB基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。