Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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La/SSB Plasmide Double Nickase (h): sc-416582-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- La/SSB Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il La/SSB Double Nickase Plasmid (h) e il La/SSB Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SSB. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: La/SSB Antibody (312B): sc-80656
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
La/SSB Plasmide Double Nickase (h) | sc-416582-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
La/SSB Plasmide Double Nickase (h2) | sc-416582-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’SSB umano codifica la fosfoproteina legante l’RNA La/SSB, un fattore ubiquitario che si associa ai trascritti della RNA polimerasi III per proteggere gli RNA nascenti e favorirne la maturazione. La/SSB partecipa al controllo qualità dell’RNA stabilizzando pre-tRNA, snRNA U6, rRNA 5S e altri piccoli RNA, e contribuisce alla regolazione della traduzione in condizioni di stress cellulare tramite interazioni con specifici mRNA. Attraverso questi ruoli, SSB collega il metabolismo dell’RNA a processi quali l’assemblaggio delle ribonucleoproteine, le risposte allo stress e il mantenimento della proteostasi. Autoanticorpi contro La/SSB sono frequentemente osservati nelle malattie autoimmuni sistemiche, tra cui la sindrome di Sjögren e il lupus eritematoso sistemico, rendendolo un bersaglio molecolare ampiamente usato per analizzare le vie immuno-associate RNA–proteina.
La/SSB Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SSB nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SSB. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SSB. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SSB interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.