KLK12 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407376

Descripción general

KLK12 codifica la peptidasa 12 relacionada con calicreína, una proteasa de serina secretada que contribuye a la remodelación de la matriz extracelular y a la proteólisis pericelular. Al procesar sustratos peptídicos e influir en la actividad de cascadas de proteasas, KLK12 puede modular las interacciones célula–matriz, la homeostasis tisular y eventos de señalización vinculados con la migración y las respuestas angiogénicas. Se ha informado de una expresión alterada de KLK12 en múltiples patologías humanas, incluidos cánceres, donde los cambios en el equilibrio proteolítico pueden afectar procesos del microambiente asociados a la invasión. Como proteasa soluble con actividad dependiente del contexto, KLK12 se estudia con frecuencia en modelos de biología tumoral, regulación vascular y remodelación tisular relacionada con la inflamación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO KLK12 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KLK12 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KLK12 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KLK12 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KLK12.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KLK12 para la investigación de la señalización de KLK12, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de KLK12 críticos para la función de KLK12
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KLK12 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido KLK12 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KLK12 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KLK12. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KLK12 (h) y el plásmido HDR KLK12 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KLK12 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KLK12 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.