KIR3DL3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406227

Descripción general

KIR3DL3 codifica un receptor inhibidor tipo inmunoglobulina de las células citolíticas (KIR) que se expresa en subpoblaciones de células NK y de células T, donde contribuye a la vigilancia inmunitaria al atenuar la citotoxicidad y la liberación de citocinas mediante el reclutamiento, dependiente de ITIM, de fosfatasas como SHP-1/2. Al modular la señalización aguas abajo de los receptores activadores, KIR3DL3 ayuda a ajustar el equilibrio entre activación inmunitaria y tolerancia, influyendo en vías que regulan la función efectora de los linfocitos y el reconocimiento de células diana. La variación en el contenido y la expresión de los genes KIR se estudia con frecuencia en el contexto de interacciones inmunitarias dependientes de HLA, con implicaciones para la inmunología tumoral, las respuestas antivirales y la inmunobiología del trasplante. Una señalización desregulada de receptores inhibidores puede alterar los puntos de ajuste del sistema inmune en la infección crónica, la autoinmunidad y la evasión inmunitaria asociada al cáncer, lo que convierte a KIR3DL3 en una diana útil para estudios mecanísticos de una regulación inhibidora tipo “checkpoint” en linfocitos innatos y similares a los innatos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO KIR3DL3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KIR3DL3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KIR3DL3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KIR3DL3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KIR3DL3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KIR3DL3 para la investigación de la señalización de KIR3DL3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de KIR3DL3 críticos para la función de KIR3DL3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KIR3DL3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido KIR3DL3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KIR3DL3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KIR3DL3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KIR3DL3 (h) y el plásmido HDR KIR3DL3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KIR3DL3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KIR3DL3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.