Plasmide Double Nickase (h) KDEL receptor 1: sc-402751-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) KDEL receptor 1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide KDEL receptor 1 Double Nickase (h) et le plasmide KDEL receptor 1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KDELR1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) KDEL receptor 1 | sc-402751-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) KDEL receptor 1 | sc-402751-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KDELR1 code le récepteur KDEL 1, un récepteur clé du recyclage Golgi‑vers‑RE qui reconnaît les protéines solubles du RE portant le motif KDEL et contribue au maintien de la protéostasie du RE. En couplant la liaison du ligand dans le Golgi au transport rétrograde médié par COPI et à une libération dépendante du pH dans le RE, KDELR1 aide à réguler la voie sécrétoire précoce, le contrôle qualité du RE et la signalisation d’adaptation au stress. Une perturbation de la fonction de KDELR1 peut dérégler le tri des protéines et l’homéostasie de la sécrétion, affectant des processus tels que la dynamique de la réponse aux protéines mal repliées (UPR) et la fidélité du trafic intracellulaire. Les altérations du transport RE–Golgi et des voies de protéostasie sont largement pertinentes pour la recherche sur le stress cellulaire, la signalisation immunitaire et divers phénotypes associés au mauvais repliement des protéines.
KDEL receptor 1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KDELR1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KDELR1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KDELR1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KDELR1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.