JMJD4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406639

Descripción general

JMJD4 codifica una oxigenasa dependiente de 2-oxoglutarato que contiene un dominio JmjC, implicada en reacciones de hidroxilación postraduccional que pueden influir en la estabilidad y la función de las proteínas. La actividad de JMJD4 se ha vinculado a la regulación de procesos relacionados con la traducción mediante la modificación de factores ribosomales y de unión a ARN, con efectos posteriores sobre la proteostasis y las respuestas celulares al estrés. Al conectar la química de las oxigenasas con el control de la expresión génica, JMJD4 se estudia en vías que incluyen la detección metabólica, la señalización asociada a hipoxia y la remodelación adaptativa de la maquinaria de traducción. La desregulación de estos procesos es relevante para estados proliferativos y adaptados al estrés, lo que convierte a JMJD4 en una diana útil para estudios mecanísticos en biología del cáncer y programas relacionados de control transcripcional y traduccional.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO JMJD4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen JMJD4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del JMJD4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de JMJD4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína JMJD4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en JMJD4 para la investigación de la señalización de JMJD4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de JMJD4 críticos para la función de JMJD4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de JMJD4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido JMJD4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido JMJD4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus JMJD4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR JMJD4 (h) y el plásmido HDR JMJD4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología JMJD4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana JMJD4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.