Plasmide Double Nickase (h) ITM2A: sc-406060-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ITM2A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ITM2A Double Nickase (h) et le plasmide ITM2A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ITM2A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ITM2A | sc-406060-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ITM2A | sc-406060-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITM2A (integral membrane protein 2A) est une glycoprotéine transmembranaire de type II appartenant à la famille à domaine BRICHOS, localisée aux membranes intracellulaires ainsi qu’à la surface cellulaire, et jouant des rôles importants dans les lignages hématopoïétiques et lymphoïdes. Elle a été associée à la régulation des programmes de différenciation cellulaire et d’événements de signalisation associés à la membrane qui façonnent le développement et l’activation des cellules immunitaires. L’expression d’ITM2A est souvent étudiée dans le contexte du contrôle transcriptionnel et de l’engagement de lignée, notamment au sein des voies qui gouvernent la maturation des lymphocytes T et la différenciation spécifique des tissus. Des variations de l’abondance d’ITM2A ont été rapportées dans plusieurs contextes pertinents pour la maladie, ce qui étaye son utilisation comme nœud moléculaire pour l’étude de la dérégulation immunitaire et des états transcriptionnels associés au cancer.
ITM2A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ITM2A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ITM2A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ITM2A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ITM2A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.