Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ISYNA1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404785
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ISYNA1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ISYNA1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ISYNA1 Anticuerpo (C-9): sc-271830
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ISYNA1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404785 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ISYNA1 (inositol-3-fosfato sintasa 1) codifica la enzima limitante de la velocidad que convierte la glucosa-6-fosfato en mio-inositol-3-fosfato, proporcionando un punto de entrada clave en la biosíntesis *de novo* de mio-inositol. El mio-inositol aporta precursores para el fosfatidilinositol y para lípidos de señalización fosfoinositídicos que regulan el tráfico de membranas, la señalización acoplada a receptores, la dinámica del citoesqueleto y la homeostasis intracelular del calcio. A través de su contribución al metabolismo de PI/PI(4,5)P2/PI(3,4,5)P3, ISYNA1 influye en vías como PI3K–AKT y la señalización impulsada por PLC, que modelan la proliferación, las respuestas al estrés y la diferenciación. Las alteraciones en la homeostasis de inositol y fosfoinosítidos se han implicado en fenotipos metabólicos y del neurodesarrollo, lo que convierte a ISYNA1 en un objetivo útil para estudios mecanísticos de señalización y dinámica de membranas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ISYNA1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ISYNA1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ISYNA1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ISYNA1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ISYNA1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ISYNA1 para la investigación de la señalización de ISYNA1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ISYNA1 críticos para la función de ISYNA1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ISYNA1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ISYNA1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ISYNA1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ISYNA1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ISYNA1 (h) y el plásmido HDR ISYNA1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ISYNA1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ISYNA1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.