ISGF-3γ p48 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421156

Descripción general

Irf9 codifica ISGF-3γ p48 (también conocido como IRF9), un componente de unión al ADN del complejo factor 3 de genes estimulados por interferón (ISGF3) que se asocia con STAT1 y STAT2 para impulsar la transcripción de genes estimulados por interferón. En células de ratón, IRF9 es central en la señalización de interferón de tipo I y tipo III, conectando la activación de JAK–STAT con programas de restricción antiviral, presentación de antígenos y una regulación más amplia de la inmunidad innata. Mediante la modulación de redes de ISG, IRF9 influye en el tono inflamatorio, la capacidad de respuesta a citocinas y la comunicación entre células inmunitarias en los tejidos. La actividad desregulada de IRF9/ISGF3 se estudia con frecuencia en contextos de susceptibilidad a virus, firmas de interferón asociadas a autoinmunidad y patología impulsada por inflamación relevante para modelos de cáncer y enfermedades metabólicas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ISGF-3γ p48 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Irf9 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Irf9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Irf9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ISGF-3γ p48.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Irf9 para la investigación de la señalización de ISGF-3γ p48, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Irf9 críticos para la función de ISGF-3γ p48
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Irf9 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ISGF-3γ p48 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ISGF-3γ p48 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Irf9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ISGF-3γ p48 (m) y el plásmido HDR ISGF-3γ p48 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Irf9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Irf9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.