Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) IRSp53: sc-403072-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IRSp53 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IRSp53 Double Nickase (h) et le plasmide IRSp53 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BAIAP2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IRSp53 Antibody (46): sc-136470
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IRSp53 | sc-403072-NIC | 20 µg | $410.00 |
BAIAP2 code pour IRSp53, une protéine adaptatrice contenant un domaine I-BAR qui relie la détection de la courbure membranaire au remodelage du cytosquelette d’actine, en coordonnant la signalisation des petites GTPases de la famille Rho et des régulateurs de l’actine tels que WAVE et Mena/VASP. IRSp53 favorise la formation de filopodes et de lamellipodes, l’endocytose, ainsi que des voies dépendantes des facteurs de croissance qui contrôlent la migration cellulaire, l’adhérence et la croissance des neurites. Par ces fonctions, BAIAP2 est fréquemment étudié dans des contextes où la dynamique du cytosquelette et le trafic membranaire façonnent le comportement cellulaire, notamment lors de processus neurodéveloppementaux et synaptiques. La dérégulation des réseaux associés à IRSp53 a été examinée en lien avec des phénotypes d’altération de la motilité et de l’invasion cellulaires, ainsi qu’avec la biologie des maladies neurologiques.
IRSp53 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BAIAP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BAIAP2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BAIAP2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BAIAP2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.