Plásmido Doble Nickase (h) IRGC1: sc-412702-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)IRGC1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IRGC1 (h) y el plásmido de doble nickasa IRGC1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a IRGC. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) IRGC1 | sc-412702-NIC | 20 µg | $410.00 |
IRGC (familia de GTPasas relacionadas con la inmunidad, miembro C) codifica IRGC1, una pequeña GTPasa inducible por interferón implicada en programas de defensa intrínsecos de la célula y en la remodelación dinámica de membranas intracelulares. Como parte de la red más amplia de IRG/GBTPasas, se considera que IRGC1 se conecta con la señalización de la inmunidad innata, el tráfico vesicular y procesos ligados a la autofagia que influyen en la restricción de patógenos y la homeostasis inflamatoria. La regulación alterada de GTPasas estimuladas por interferón se ha asociado con una señalización de citocinas desregulada y patología tisular mediada por el sistema inmunitario, lo que convierte a IRGC en un locus útil para estudios mecanísticos de vías sensibles al interferón. Por lo tanto, la IRGC1 humana es de interés para desentrañar pasos dependientes de GTPasas en la defensa del huésped y en las respuestas al estrés celular.
IRGC1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IRGC en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IRGC. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IRGC. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IRGC alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.