Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
IQGAP3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406335
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- IQGAP3 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico IQGAP3, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IQGAP3 Anticuerpo (D-10): sc-393451
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
IQGAP3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406335 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
IQGAP3 (proteína activadora de GTPasa que contiene motivo IQ 3) es una proteína de andamiaje que coordina la señalización y la dinámica del citoesqueleto al acoplar pequeñas GTPasas, factores reguladores de la actina y cascadas de quinasas. Contribuye a la progresión del ciclo celular, la migración direccional y la remodelación de la adhesión, integrando entradas de vías como MAPK/ERK y la señalización de GTPasas de la familia Rho para configurar programas de proliferación y motilidad. Se ha descrito una expresión desregulada de IQGAP3 en múltiples contextos tumorales y con frecuencia se estudia por su asociación con una mayor proliferación, invasividad y características epitelio‑mesenquimales alteradas. Como gen humano, IQGAP3 se utiliza ampliamente como un nodo para desentrañar el control a nivel de red de la organización del citoesqueleto y la señalización mitogénica en modelos mecanísticos de enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO IQGAP3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen IQGAP3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del IQGAP3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de IQGAP3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IQGAP3.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en IQGAP3 para la investigación de la señalización de IQGAP3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de IQGAP3 críticos para la función de IQGAP3
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de IQGAP3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido IQGAP3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido IQGAP3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus IQGAP3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IQGAP3 (h) y el plásmido HDR IQGAP3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología IQGAP3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana IQGAP3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.