Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421160

Übersicht

Itga2b kodiert Integrin αIIb (CD41), das sich mit Integrin β3 (CD61) zum Thrombozyten-Fibrinogenrezeptor αIIbβ3 verbindet, einem zentralen Vermittler der Thrombozytenadhäsion und -aggregation. Nach Aktivierung durchläuft αIIbβ3 Inside-out- und Outside-in-Signalisierung, die Liganden der extrazellulären Matrix wie Fibrinogen und den von-Willebrand-Faktor mit Zytoskelett-Umbau, Fokalkontakt-Dynamik und Src/FAK-abhängigen Signalwegen verknüpft. In der Maus kennzeichnet die Itga2b-Expression die Festlegung auf die Megakaryozyten-Linie und unterstützt die Thrombozytenbildung sowie hämostatische Reaktionen. Fehlregulierte Integrin-Signalisierung und veränderte Thrombozytenaktivierung sind in Studien zu Thrombozytopenie, Blutungsphänotypen, entzündungsassoziierter Thrombose und der Thrombozyten–Immun-Crosstalk in Modellen vaskulärer Erkrankungen breit relevant.

Das Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Itga2b-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Itga2b-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Itga2b nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Integrin αIIb/ITGA2B/CD41-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Itga2b-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Integrin αIIb/ITGA2B/CD41-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Itga2b-Exone abzielen, die für die Integrin αIIb/ITGA2B/CD41-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Itga2b-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Itga2b-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 HDR-Plasmid (m) und Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Itga2b-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Itga2b-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.