Integrin αE/ITGAE/CD103 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404333

Visão geral

ITGAE codifica a integrina αE (CD103), que forma um heterodímero com a integrina β7 para gerar a αEβ7, um recetor de adesão que se liga à E-caderina e favorece a retenção de linfócitos em tecidos epiteliais. Esta integrina contribui para o tráfego de células imunitárias, a residência tecidular e a organização da sinapse imunológica, integrando sinais da matriz extracelular e de adesão célula–célula com a remodelação do citoesqueleto e vias de sinalização “outside-in” que influenciam o estado de ativação. O CD103 é amplamente utilizado como marcador de células T de memória residentes no tecido e de subpopulações de células dendríticas, e a sua função cruza-se com vias que controlam a imunidade da barreira epitelial e a vigilância mucosal. Interações mediadas por αEβ7 desreguladas têm sido associadas a processos inflamatórios e autoimunes em tecidos de barreira e à composição do microambiente imunitário tumoral, tornando o ITGAE um alvo relevante para estudos mecanísticos sobre infiltração imunitária e comunicação cruzada epitélio–sistema imunitário.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Integrin αE/ITGAE/CD103 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ITGAE em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ITGAE, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ITGAE na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Integrin αE/ITGAE/CD103.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ITGAE para a investigação da sinalização de Integrin αE/ITGAE/CD103, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ITGAE críticos para a função Integrin αE/ITGAE/CD103
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ITGAE para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Integrin αE/ITGAE/CD103 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Integrin αE/ITGAE/CD103 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ITGAE. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Integrin αE/ITGAE/CD103 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Integrin αE/ITGAE/CD103 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ITGAE para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ITGAE definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.