Integrin αE/ITGAE/CD103 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404333

Descripción general

ITGAE codifica la integrina αE (CD103), que forma un heterodímero con la integrina β7 para constituir αEβ7, un receptor de adhesión que se une a la E-cadherina y favorece la retención de linfocitos en tejidos epiteliales. Esta integrina contribuye al tráfico de células inmunitarias, a la residencia tisular y a la organización de la sinapsis inmunológica, integrando señales de la matriz extracelular y de adhesión célula–célula con la remodelación del citoesqueleto y vías de señalización “outside-in” que influyen en el estado de activación. CD103 se utiliza ampliamente como marcador de linfocitos T de memoria residentes en tejido y de subpoblaciones de células dendríticas, y su función se intersecta con vías que controlan la inmunidad de la barrera epitelial y la vigilancia mucosal. Las interacciones mediadas por αEβ7 cuando están desreguladas se han asociado con procesos inflamatorios y autoinmunes en tejidos de barrera y con la composición del microambiente inmunitario tumoral, lo que convierte a ITGAE en una diana relevante para estudios mecanísticos de la infiltración inmunitaria y del diálogo epitelio–inmune.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Integrin αE/ITGAE/CD103 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ITGAE en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ITGAE junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ITGAE tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Integrin αE/ITGAE/CD103.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ITGAE para la investigación de la señalización de Integrin αE/ITGAE/CD103, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ITGAE críticos para la función de Integrin αE/ITGAE/CD103
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ITGAE para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Integrin αE/ITGAE/CD103 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Integrin αE/ITGAE/CD103 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ITGAE. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Integrin αE/ITGAE/CD103 (h) y el plásmido HDR Integrin αE/ITGAE/CD103 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ITGAE para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ITGAE definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.