Inhibin β-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421131
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Inhibin β-B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Inhibin β-B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Inhibin β-B Anticorpo (H-8): sc-376971
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Inhibin β-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421131 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Inhbb codifica a inibina beta-B, uma subunidade da superfamília TGF-β que forma homodímeros de activina B ou heterodímeros de activina AB com a INHBA, modulando a transcrição dependente de SMAD2/3. A sinalização por activina regula o desenvolvimento gonadal, a foliculogénese, a função das células de Sertoli e da granulosa, e um controlo mais amplo da proliferação e diferenciação celulares, bem como da remodelação da matriz extracelular. No rato, alterações na atividade de Inhbb têm sido associadas a fenótipos reprodutivos e a desregulação endócrina, e a sua via cruza-se com programas inflamatórios e fibróticos através do controlo dependente do contexto da expressão de citocinas e da remodelação tecidular. Estas propriedades tornam o Inhbb um nó útil para estudar a arquitetura da via TGF-β/activina em biologia do desenvolvimento e em estados celulares relevantes para a doença.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Inhibin β-B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Inhbb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Inhbb, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Inhbb na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Inhibin β-B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Inhbb para a investigação da sinalização de Inhibin β-B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Inhbb críticos para a função Inhibin β-B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Inhbb para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Inhibin β-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Inhibin β-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Inhbb. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Inhibin β-B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Inhibin β-B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Inhbb para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Inhbb definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.