Partículas Lentivirales de Activación (h) IL-8RB: sc-401404-LAC

CXCR2 codifica el receptor beta de interleucina‑8 (IL‑8RB), un GPCR de clase A que se une a quimiocinas CXC ELR+ como CXCL8/IL‑8 para coordinar la quimiotaxis y la activación de leucocitos. Tras la unión del ligando, IL‑8RB señaliza a través de vías dependientes de Gαi para regular PI3K–AKT, PLCβ–flujo de Ca²⁺, las cascadas MAPK/ERK y la internalización del receptor mediada por β‑arrestina, modulando el tráfico inflamatorio y las funciones efectoras de los neutrófilos. La actividad de CXCR2 converge con programas de citocinas y de NF‑κB e influye en las interacciones endoteliales, las señales angiogénicas y la remodelación dentro de los tejidos inflamados. La señalización desregulada de CXCR2 se ha implicado en estados inflamatorios crónicos y en la inflamación asociada a tumores, lo que respalda estudios mecanísticos sobre el reclutamiento de células inmunitarias y la señalización del microambiente.

Las partículas de activación lentiviral IL-8RB (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de CXCR2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral IL-8RB (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción CXCR2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de IL-8RB. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo CXCR2 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.