IL-6 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400390-LAC

Humanes IL6 kodiert Interleukin‑6 (IL‑6), ein pleiotropes Zytokin, das angeborene und adaptive Immunantworten koordiniert, indem es Akut‑Phase‑Signalwege, die Rekrutierung von Leukozyten und die Differenzierung von B‑Zellen reguliert. IL‑6 bindet an den IL‑6‑Rezeptor (IL‑6R) und den Korezeptor gp130 und aktiviert dadurch JAK/STAT3 sowie die MAPK‑ und PI3K‑AKT‑Signalwege, was entzündliche Transkriptionsprogramme und Entscheidungen zum Zellüberleben prägt. Eine fehlregulierte IL‑6‑Signalgebung ist mit chronischer Entzündung, Autoimmunpathologie, Infektionsbiologie und tumorassoziierter Entzündung verknüpft, wodurch IL6 ein zentraler Knotenpunkt für die Untersuchung von Zytokinnetzwerken und der Kommunikation zwischen Immun‑ und Stromazellen ist. In der Forschung wird IL6 häufig profiliert, um extrazelluläre Stresssignale mit nachgeschalteter, STAT‑getriebener Genexpression, metabolischer Umprogrammierung sowie myeloiden/lymphoiden Funktionszuständen zu verknüpfen.

IL-6 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente IL6-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

IL-6 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der IL6-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen IL-6-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen IL6-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.